无菌技术综合操作实验报告(无菌技术综合操作实验报告模板)
无菌技术操作实验报告怎么写?
一) 无菌技术操作原则
1、 环境要清洁.进行无菌技术操作前半小时,须停止清扫地面等工作,避免不必要的人群流动,防止尘埃飞扬.治疗室每日用紫外线照射消毒一次.
2、 进行无菌操作时,衣帽穿戴要整洁.帽子要把全部头发遮盖,口罩须遮住口鼻,并修剪指甲,洗手.
3、 无菌物品与非无菌物品应分别放置,无菌物品不可暴露在空气中,必须存放于无菌包或无菌容器内,无菌物品一经使用后,必须再经无菌处理后方可使用,从无菌容器中取出的物品,虽未使用,也不可放回无菌容器内.
4、 无菌包应注明无菌名称,消毒灭菌日期,并按日期先后顺序排放,以便取用,放在固定的地方.无菌包在未被污染的情况下,可保存7-14天,过期应重新灭菌.
5、 取无菌物品时,必须用无菌钳(镊).未经消毒的物品不可触及无菌物或跨越无菌区.
6、 进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染,即不可使用,应更换或重新灭菌.
7、 一套无菌物品,只能供一个病员使用,以免发生交叉感染.
(二) 准备质量标准
1、 工作人员着装整洁,洗手、戴口罩、修剪指甲.
2、 备齐用物.
3、 治疗盘、无菌持物钳或镊,浸泡于消毒溶液内,无菌溶液、无菌包布、无菌容器及物品、无菌手套、弯盘、75%酒精、无菌棉签.
4、 查对无菌物品、灭菌日期及手套号.
5、 用物排放有序,符合无菌操作要求.
(三) 操作流程质量标准
1、 选择清洁、干燥、宽阔的场所进行操作.
2、 解开无菌包系带卷放在包布下边.
3、 用拇指和食指先揭左右两角,最后揭开内角,注意手不可触及包布的内面.用无菌钳(镊)取出一块无菌巾放于治疗盘内,剩余部分按原折痕包起扎好,并注明开包时间.
4、 铺无菌盘:
单巾铺盘:双手拇、食指捏住治疗巾两上角外面,轻轻抖开,双折铺于治疗盘上,内面为无菌区,盖的半幅成扇形折到对面无菌盘上,开口边向外,放入无菌物品后,边缘对齐盖好.将开口处向上翻折两次,两侧边缘向下翻一次,以保持无菌.
双巾铺盘:双手捏住无菌巾的左右两上角的外面,轻轻抖开,由远向近铺于治疗盘上,无菌面向上,放入无菌物品.依上法夹取另一块无菌巾,由近侧向对侧覆盖于治疗盘内上,边缘多余部分反折,不应暴露无菌区.
5、 打开无菌容器盖,必须把盖的无菌面(内面)向上,放在稳妥处,夹取所需物品放入无菌盘内后立即盖严.
6、 倒无菌溶液,仔细检查核对溶液后,面对瓶签两拇指将橡皮塞向上翻转,再用一拇、食指将橡皮塞拉出,用食、中指套住橡皮塞,另一手(或同一只手)握住瓶签倒出少许溶液冲净瓶口,再由原处倒出所需溶液于无菌容器中,套上瓶塞并消毒翻转部分与瓶颈(从非污染处到污染处)后立即盖好,并注明开瓶时间.
7、 打开无菌盘上层无菌巾一部分,核对无菌手套袋上所注明的手套号码、灭菌日期和消毒指示胶带,然后将手套袋摊开,取出滑石粉包,将粉擦于手掌、手背和指间,以一手掀起手套内袋开口处,另一手捏住手套翻折部分(手套内面)取出手套,使手套的两拇指相对,一手伸入手套内戴好,再以戴好手套的手伸入另一手套的反折部分,依法戴好另一手套,将反折部分翻转套在工作服衣袖外面,揭开无菌盘进行无菌操作.
8、 持无菌容器时应托住底部,不可触及容器内面及边缘.
9、 开包递送无菌物品时,一手托起无菌包,另一手打开无菌包一角,将带子卷起夹在托包的手指缝内,另一手依次打开其它三角并抓住递送或稳妥地将包内物品放入无菌容器中(无菌区域内).
10、 操作完毕,从手套口翻转向下脱去手套,整理用物.
(四) 终末质量标准
1、 操作有序,方法正确,无菌概念清楚,无菌观念强.
2、 能口述无菌操作的原则与注意事项.
(五) 注意事项
1、 开包后的无菌包和开封后的无菌溶液有效期均为24小时,无菌盘有效期限不超过4小时.
2、 无菌持物钳取时不可触及容器口边缘及溶液以上的容器内壁.使用时应保持钳端向下,不可倒转向上,用后立即放入容器中.如到远处夹取物品时,无菌持物钳应连同容器一并搬移,就地取出使用.无菌持物钳只能用于夹取无菌物品,不能用于换药和消毒皮肤.无菌持物钳及其浸泡消毒容器,应每周清洁消毒二次,并更换消毒溶液及纱布.门诊换药室或使用较多的部门,应每日清洁消毒一次. 3、 使用无菌瓶内的溶液时,不可将无菌敷料堵塞瓶口倾倒无菌溶液,或直接伸入溶液瓶内蘸取,以免污染剩余的溶液.
4、 无菌包内物品不慎污染或无菌包浸湿,外界微生物可渗入包内,造成污染,需重新消毒.
5、 戴手套时应注意未戴手套的手不可触及手套外面,而戴手套的手则不可触及未戴手套的手或另一手套的里面.戴手套后如发现破裂,应立即更换.脱手套时,须将手套口翻转胶下,不可用力强拉手套边缘或手指部分,以免损坏.
护理无菌技术实验报告怎么写?
1、实验名称以及姓名学号
要用最简练的语言反映实验的内容。如验证某程序、定律、算法,可写成“验证什么”、“分析什么”等。
2、实验日期和地点
比如2020年4月25日,物理实验室。
3、实验目的
目的要明确,在理论上验证定理、公式、算法,并使实验者获得深刻和系统的理解,在实践上,掌握使用实验设备的技能技巧和程序的调试方法。一般需说明是验证型实验还是设计型实验,是创新型实验还是综合型实验。
实验报告的写作对象:
主要内容如下所示:
是科学实验的客观事实,内容科学,表述真实、质朴,判断恰当。实验报告以客观的科学研究的事实为写作对象,它是对科学实验的过程和结果的真实记录,虽然也要表明对某些问的观点和意见,但这些观点和意见都是在客观事实的基础上提出的。
环境因素对微生物的影响实验报告是什么?
环境因素对微生物的影响实验报告如下:
一、 实验目的。
1. 熟悉常用微生物培养基的配置方法。
2. 学习并掌握各种无菌操作技术,并用此技术进行微生物稀释分离、划线分离接种。
3. 用平板划线法和稀释法分离微生物。
4. 认识微生物存在的普遍性,体会无菌操作的重要性。
二、 实验原理。
土壤中有数量巨大、种类丰富的微生物,可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的是平板分离法。
平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释,使其中的微生物充分分散成单个细胞,取一定量的稀释样液接种到平板上,经过培养,由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落,即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数,根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品含菌数。
三、 实验器材。
土样10g,牛肉膏蛋白胨培养平板20个,未知菌种平板,当天降雪。
平皿,涂棒,接种环,无菌200ul, 1000ul吸头,记号笔,酒精灯,取液器:1000ul 、200ul各一支,培养箱。
0.9% 无菌生理盐水,250ml三角瓶中装99ml生理盐水,每瓶加约20粒玻璃珠,250ml三角瓶中99ml生理盐水,作100倍稀释用。
四、 实验步骤。
1. 配置培养基:取牛肉膏5g,蛋白胨10g,NaCl5g,蒸馏水1000ml配置培养基,调pH至7.2,灭菌。于讲课前倒板20块。
2. 采集野外样品:选择肥沃土壤,去表层土,挖5~20cm深度的土壤数10g,装入烧杯,带回实验室;取校河水装入烧杯,带回实验室;取新积雪中间层转入烧瓶,带回实验室。
3. 制备土壤稀释液:称取土样1.0g,放入盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中,用手振荡5min使土壤均匀分散成为土壤悬液(10-2)。用200ul的无菌吸头从中吸取0.1ml土壤悬液,注入事先分装有0.9ml无菌水的试管中,吹吸3次,摇匀(10-3)。类推制得10-4、10-5的土壤悬液。
4. 涂板:
1) 土壤稀释液(9块):用无菌吸头,分别吸取10-3、10-4、10-5浓度土壤稀释液100ul,较均匀地放入已写好稀释度的牛肉蛋白胨培养基平板上,用无菌玻璃涂棒涂匀。每个浓度做3个平板。
2) 单菌落划线(4块):用接种环挑取未知平班上的菌落,做单菌落划线分离,每人2板。
3) 手指(1块):分别用未洗过的手指头, 用自来水打湿的手指头,用自来水洗过的手指头,用肥皂洗过的手指头和用酒精棉球擦过的手指头(不用毛巾擦)在同一平板的不同分区涂抹(用力一致)。
4) 硬币(1块):取3枚1角硬币,按在平板的3个分区。
5) 头发(1块):放置一根头发,用无菌图布棒压紧在培养基上。
6) 牙垢(1块):用无菌牙签取一点牙垢在培养基上划线。
7) 空气(2块):打开培养皿置实验台上(空气中)10min,按无菌操作要求在酒。精灯火焰边打开皿盖1min。
8) 积雪(1块):用移液器吸取100ul雪水,较均匀地放入已写好稀释度的牛肉蛋。白胨培养基平板上,用无菌玻璃涂棒涂匀。
5. 培养:用报纸包好倒置35℃培养箱里培养24小时。
6. 观察结果:对土壤稀释液平板进行计数,单菌落划线平板分离单菌落,其他平板观。察微生物种类、数量。所有平板都要照相。
能发篇兽医 综合实验报告给吗?谢谢
华南农业大学实验报告 实验项目名称: 《兽医微生物》综合实习 所属课程名称: 《兽医微生物学》 学生姓名:杨滨 学号:200730330126 专业年级:07 动医(1)班 成绩: 一,实验目的 1.掌握营养肉汤,血琼脂平板,麦康凯平板,普通琼脂,三糖铁层琼脂的配置方法. 2.细菌的分离培养技术(解剖,病料的采集,从组织中分离细菌,培养细菌,移植细菌, 纯化细菌,细菌接种) . 3.细菌的鉴定技术(光学显微镜油镜的技术,组织涂片,在组织材料中认识细菌,辨别细 菌,生化实验,血清学实验技术及细菌片的涂片,染色,镜检等技术) . 4.病毒的鸡胚分离培养技术(鸡胚死活的鉴定,鸡胚的接种,胚液的收集)病毒的血凝试 验和血凝抑制试验. 5.认识真菌(酵母菌,青霉菌,曲霉菌,毛霉菌,根霉菌)的形态. 二,实验要求 1.通过本次综合实习全面系统地掌握兽医微生物学的基本技术和细菌检验的基本程序,掌 握各种生理生化试验的原理及试验方法,将理论与实践有机统一. 2.加强对临床常见病原菌鉴定本领的操作训练. 3.熟练掌握微生物实验常用仪器的使用及培养基制备的原则和方法. 4.对每一步实验要认真对待,对实验结果应详细记录,仔细分析,以便得出正确的鉴定结 论,实习结束后,全面总结并写出实习报告. 三,实验内容 1.细菌的分离及诊断 2.病毒的分离及诊断 3.真菌的观察 四,实验材料与设备 1.实验材料 (1) 无菌注射器,抗凝剂,健康鸡,健康兔,血琼脂基础,锥形瓶,蒸馏水,麦康凯 琼脂粉,三糖铁琼脂粉,营养琼脂粉,营养肉汤基础,雏鸡,小白鼠,木板,图钉,剪刀, 接种环,接种针,镊子,各种染色液,移液枪,葡萄糖培养管,蔗糖培养管,乳糖培养管, 甘醇培养管,靛基质培养管,硫化氢培养管,H2O2,氧化酶试纸,巴氏杆菌标准毒,巴氏 杆菌阳性血清,靛基质指示剂,载玻片,显微镜等 (2) 装有不明病毒的 80 编号小管一支,9-10 日龄鸡胚,打孔器,一次性注射器,剪 刀,记号笔,镊子,灭菌乳钵,离心管,空平皿,玻璃沙,空试管几支,西林瓶,青霉素, 移液管,锥型瓶,U 型 96 孔微量反应板,蛋架 (3)载玻片,接种环,酵母菌玻片,青霉菌玻片,曲霉菌玻片,毛霉菌玻片,根霉菌玻 片,镊子,盖玻片,显微镜 2.实验设备高压消毒炉,恒温培养箱,离心机,电子天平,冰箱,轻微振荡器 五,实验方法和步骤 实验方法和步骤 (一)细菌的的分离及诊断 1.实验前准备(此步分量为一组 6 个人) (1)心脏采血:触摸健康兔左前肢以下,胸骨以上,靠左的位置,通过心跳感觉心脏 位置, 用碘酒,酒精棉球消毒,用无菌注射器抽取 1ml 抗凝剂,并润湿注射器, 待酒精干后, 将针插入,边插边回抽,当有血冲上针筒时,即抽取血 9ml,用作血平板. (2)血琼脂平板:称取琼脂基础 3.3g,加 100ml 蒸馏水,加热溶解,倒入锥形瓶,高 压灭菌 15min,待冷却至 50℃,加入无菌脱纤维鸡兔血 10ml,摇匀,倾注至灭菌平皿. (3)麦康凯平板:称取麦康凯琼脂粉 14.3g,加 600ml 蒸馏水,加热溶解,倒入锥形瓶, 高压灭菌 15min,倾注至灭菌平皿. (实验室准备) (4)三糖铁琼脂:称取三糖铁琼脂粉 15g,加 240ml 蒸馏水,加热溶解,分装到试管, 每支约 10ml,高压灭菌 15min,趁热摆斜面,待其凝固. (实验室准备) (5)营养肉汤:称取营养肉汤基础 4.4g,加 200ml 蒸馏水,加热溶解,分装到试管,每 支约 10ml,高压灭菌 15min. (实验室准备) 2.分离培养取一因细菌感染而致死的小鼠,腹部向上固定于木板上,用酒精棉球消毒体表,打开腹 腔,暴露肝脏,用剪刀夹一燃烧酒精棉球,在肝脏表面烫之杀死表面杂菌,用灭菌接种环插 入烧灼部,将接种环旋转 1 圈,然后取材划线接种于血琼脂平板上,置 37℃温箱培养 24h. 3.形态与染色小鼠作分离培养后,用灭菌镊子和剪刀取一小块肝脏,作组织涂片,进行瑞氏染色,镜 检.观察细菌形态特征. 4.肉汤增菌培养观察血琼脂平板上的细菌菌落形态特征, 然后用灭菌接种环挑取可疑菌落, 涂抹到载玻 片上, 进行革兰氏染色, 镜检. 用灭菌接种针环挑取可疑菌落, 接种到加有血清的营养肉汤, 摇匀,置 37℃温箱培养 24h. 5.生化实验 观察肉汤变化情况,用灭菌接种环取肉汤中已纯化细菌,涂抹到载玻片上,进行革兰氏 染色,镜检.进行生化试验. (1)用灭菌接种环取肉汤中已纯化细菌,分别在麦康凯平板,营养琼脂上划线 (2)用灭菌接种针取肉汤中已纯化细菌,分别在葡萄糖培养管,蔗糖培养管,乳糖培养 管,甘醇培养管,靛基质培养管,硫化氢培养管进行穿刺 (3)用灭菌接种针取肉汤中已纯化细菌,在三糖铁琼脂上进行划线并穿刺. 将所有生化培养管及培养皿,置 37℃温箱培养 24h. 6.氧化酶和触酶试验用氧化酶试纸按压于菌落之上,若试纸变色则为阳性. 取过氧化氢滴加菌落,若产生气泡,则为阳性. 7.观察生化实验结果. 往靛基质培养管滴加指示剂,观察变化,其它生化管直接进行观察. (二)病毒的实验诊断 1.实验前准备 (1)心脏采血:触摸健康鸡左翼以下,胸骨以上,嗉囊靠左的位置,通过心跳感觉心脏 位置,用碘酒,酒精棉球消毒,用无菌注射器插入,边插边回抽,当有血冲上针筒时,即抽 取鸡血 2~3ml,装入密封管中,用于血清得制备;用无菌注射器抽取 1ml 抗凝剂,并润湿注 射器,用同样方法取鸡血 9ml,并装入离心管中,用于鸡红细胞的制取. (2)血细胞悬浮液:往无菌离心管注入 2~3ml 鸡血,再加入 4ml 生理盐水,摇匀,放入 离心机以 2000r/s 离心 10min,然后取出离心管并用无菌注射器吸去其上清液,重复 4 次. 用移液枪吸取 1ml 血细胞到 100ml 无菌玻璃瓶中,再加入 99ml 生理盐水,冷藏. 2.病毒病料的采集通过无菌手术,取病鸡的脾脏,肝脏,肺,脑的组织块,将其剪碎后,加入少量玻璃砂 研磨,然后加入 4ml 生理盐水和双抗各 0.01ml,用注射器将其注入离心管,以 10000r/s 进 行离心 10min. 3. 接种接种鸡胚,采用绒毛尿囊腔接种,通过照胚检测鸡胚死活,在气室边缘避开胚体和血管 处作一记号,作为接种的部位,碘酒,酒精消毒,并用打孔器在此处打孔;用 1ml 注射器吸 取病毒液 0.1ml,注射器沿小孔插入鸡胚约 1.5CM,注入病毒液以胶布封孔,置于 37 C 温箱中直立培养. . 4.观察已接种鸡胚 24 小时后观察鸡胚未死亡. 5.处理已接种鸡胚接种 48 小时后观察鸡胚已死,将鸡胚置 4 C 冷冻过夜. . 6.收胚收获病毒液.采用无菌手术去气室顶壳,开口直径为整个气室大小,用无菌镊子撕去 部分蛋膜, 撕破绒毛尿囊膜而不撕破羊膜, 用镊子轻轻按住胚胎, 用消毒注射器吸取尿囊液, 置于西林瓶中,备用.解剖胚胎. 7.血凝及血凝抑制试验采用 1%红细胞,以及新城疫的血清和禽流感血清,按下表操作. ①血细胞凝集试验(HA) (单位:ūl) 孔号 稀释 度 生理 盐水 病毒 鸡红 细胞 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 弃 1 1:2 50 2 1:4 50 3 1:8 50 4 1: 16 50 5 1: 32 50 6 1: 64 50 7 1 : 128 50 8 1 : 256 50 9 1 : 512 50 10 1 : 1024 50 11 1 : 2048 50 12 对照 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 用轻微震荡器震荡 1~2min, 放入 37℃箱中 15~30min.判断 1 个单位血凝价,并配成 4 个单位病毒溶液. 2 ○血细胞凝集抑制试验(HI) (单位:ūl) 孔号 稀释 度 生理 盐水 新城 疫血 清 1 1:2 50 2 1:4 50 3 1:8 50 4 1: 16 50 5 1: 32 50 6 1:64 50 7 1 : 128 50 8 1 : 256 50 9 1 : 512 50 10 1 : 1024 50 11 1 : 2048 50 12 对照 50 弃 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 4 单 位病 毒 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 用轻微震荡器震荡 1~2min,放入 37℃培养箱中 15~30min 鸡红 细胞 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 50 用轻微震荡器震荡 1~2min,放入 37℃培养箱中 15~30min. (三)真菌的形态观察 真菌的形态观察 直接在显微镜下观察酵母菌装片,青霉菌装片,曲霉菌装片,毛霉菌装片,根霉菌装片. 六,实验结果与分析 实验结果与分析细菌的的分离及诊断 (一) 细菌的的分离及诊断 1.瑞氏染色后,显微镜观察到蓝色,两极浓染的球杆菌 2.在血琼脂平板上培养 24 小时后,长出灰白色,湿润,有光泽,露珠状的小菌落 3.对血琼脂平板上的菌体革兰氏染色后,显微镜观察到红色,两极浓染的球杆菌 4.在营养肉汤中培养 24 小时后,原本清亮的液体变为浑浊,说明菌体在营养肉汤中大量繁 殖 5.对营养肉汤中的菌体革兰氏染色后,显微镜观察到红色,两极浓染的球杆菌,说明该菌 是革兰氏阴性菌. 6.生化试验结果: 培养 基类 型 现象 三 糖 铁 麦康 凯 葡 萄 糖 + 蔗 糖 + 乳 糖 — 甘 醇 + 靛 基 质 + 硫 化 氢 — + - 三糖铁琼脂:培养基底部变黄,说明产酸,但不产气,不产硫化氢,可能被污染 麦康凯平板:不生长 葡萄糖生化管:由原本的紫色变为黄色 蔗糖生化管:由原本的紫色变为黄色 乳糖生化管:原来的紫色变浅 甘醇生化管:由原本的紫色变为黄色 靛基质生化管:滴加指示剂后,产生玫瑰红色 硫化氢生化管:由于缺乏硫化氢指示剂,无法对硫化氢一项做出判定,该培养管并未变色. 7.氧化酶和触酶实验:氧化酶试纸变紫色,为阳性;而触酶试验产生气泡,为阳性. 以上结果与课本对照后较为接近,极有可能是巴氏杆菌. (二)病毒的实验诊断 1.24 小时后检查鸡胚未死亡,说明实验操作严格无菌操作,未感染其他细菌. 2.鸡胚收获及解剖 打开蛋壳后,提取病毒.同时接种老师提供的病毒 3.HA 试验: HA 试验结果如下表: (结果第一排为自己所收病毒液,第二排为老师所给病毒: ) 孔 号 稀 释 度 结 果 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024 1:2048 血细 胞对 照 # # # # # # # # # # # # # # # +++ +++ ++ ++ + + - - 结果:自己所收病毒血凝价为 1:256.老师所给病毒血凝价为 1:128. 4.HI 试验 HI 试验结果如下表: (结果第一排为自己所收病毒液,第二排为老师所给病毒) 孔 号 稀 释 度 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:128 1:256 1:512 1:1024 病 毒 对 照 结 果 + ++ # + # ++ # # # # # # # # 血 清 对 照 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 结果:自己所收病毒的 HI 效价为 1:32.老师所给病毒的 HI 效价为 1:128. (三)真菌的形态观察 酵母菌 青霉菌 曲霉菌 根霉菌 毛霉菌 七,实验总结 1. 通过本次实验可了解并熟悉检验位置菌种的方法, 推断菌种时要综合分析 可能污染杂菌 的实验要重复进行. 病毒的接种及吸取尿囊液时, 要注意保持无菌操作, 以防带进其他细菌, 影响实验结果. 2.在实验过程中,我就被灌输了很强的意识:一进到实验室中,就要尽可能地做好一切保 护措施,这是保护自己的基本条件和要求. 3.实验中所涉及的基本实验操作,我们都要清楚了解并且知道其中的原理,这对于我们来 说尤为重要. 4.实验中必然会遇到一些自己难以理解的问题,这要求我们要与指导老师做好沟通工作, 并且要加强团队合作精神与加深自立意识,加强自我的动手能力. 5.通过本次综合实验,我们巩固了本学期所学的普通培养基制备和鲜血培养基的制备,光 学显微镜油镜的使用,细菌片的分离培养鉴定技术,病毒的鸡胚分离培养技术(鸡胚死活的 鉴定,鸡胚的接种,胚液的收集)病毒的血凝试验和血凝抑制试验方法.提高我们综合运用 兽医微生物学所学知识的能力,实际动手能力及观察,分析问题的能力.