无菌技术实验报告总结与体会(无菌操作实验报告总结与体会)

基础护理技术穿脱隔离衣实验报告怎么写

(一)书写内容

书写内容

1.实验名称。

2.定义。

3.实验目的

(1)操作本身的目的。

(2).上实验课的目的。

4.操作前四准备

(1)护士准备。

(2)物品准备。

(3)环境准备。

(4)患者准备。

5.实施

(1)操作过程要完整描述。

(2)操作后处理要描述得当。

(3)要求评价护理效果(记录)。

(4)描述中要突出操作的重点难点。

(5)描述中要突出“三查七对”和无菌原则。

(6)描述中要突出与患者沟通交流的意识。

6.效果评价

(1)评价操作后患者的反应。2)对自我操作作总体评价。

7.讨论

(1)对操作中的重点难点进行总结。

(2)认识识自已操作中的不足。

(3)写出自己的心得体会最好具有一定的创新思维。

(二)书写要求

1.页面整洁、字迹清晰,内容完整用语准确。

无菌附录核查报告怎么写

需要包含8个内容。

1、无菌室的外观和环境条件。

2、采用的无菌工作程序。

3、对员工进行护理和操作培训的详细记录。

4、采用的无菌技术设备清单。

5、检查无菌技术保证的结果。

6、分析和处理突发事件的报告。

7、使用的消毒剂的检测结果。

8、无菌技术核查的总结报告。

手术室工作总结

总结是对某一特定时间段内的学习和工作生活等表现情况加以回顾和分析的一种书面材料，它可以明确下一步的工作方向，少走弯路，少犯错误，提高工作效益，让我们抽出时间写写总结吧。那么你知道总结如何写吗？下面是我精心整理的手术室工作总结5篇，供大家参考借鉴，希望可以帮助到有需要的朋友。

手术室工作总结 篇1

20xx年我院护理工作度过了紧张而不平凡的一年，圆满完成了医院工作重点和护理工作的总目标。顺利的晋升了三级医院，手术室工作有了可喜的进展，总结如下：

一、 护理安全的管理是手术室重中之重。

安全管理上不去，高水平的管理就成了一句空话，手术安全管理抓的好，要求严格，制度落实有力，人员素质好，技术水平高，就可以确保安全无事故。

1、 严抓细管。按照年初计划每月学习，护理制度岗位职责，无菌操作与法律法规、突发事件应急程序、院内感染等相关知识、术中配合、专科三基、基护操作，由护士长统一出题，闭卷考试，不及格再补考，成绩和评优评奖挂钩，大大激发了护士工作积极性。

2、 重点人群管理。

（1）、新上岗护士定期做岗前培训，重点跟班，工作时和责任心强、年资老的护士一组。

（2）、对高危、急危室，新开展手术配各业务熟练的护士，保证手术顺利进行。

（3）、一年内外聘专家手术多达95例，无菌意识及配合熟练受到专家好评。

（4）、重点时段。在节假日，换班及中午有比较重的手术，值班人员应随时通知二线人员，有备无患，确保安全。

二、加强护理人员思想教育，转变观念，有主动意识。

1、手术室工作应根据手术病人的特点和心理需求随着社会体制改变，从术前访视到术后随访，应给病人一全方位、无间隙整体护理。全年访视率在80%以上，从而提高工作质量。

2、每月给各科主任一张调查表，表内涉及全年满意率，对各科主任提出的意见应积极采纳，在工作中扬长避短，从而确保工作高效安全。

三、抓好三基三严和法律法规学习。

1、晨间提问1-2次，强化理论知识，提高业务水平。

2、专科提问3-4项，每月闭卷考试，成绩登记在册。

3、奖惩制度落实，真正体现制度约束人，把罚款奖励给没违规人员，激发护士按制度办事积极性。

四、对危重手术病人护理。

1、术前访视，必要时和医生沟通，对术中可能出现的问题做到有所准备。

2、备好各种抢救物品、药品。

3、特殊情况，报告护士长，台上台下双人配合，使手术顺利进行。

4、护士术前看书，熟悉手术步骤，术后做好笔记。

5、按照手术室检查标准，每周检查一次，能及时发现问题，制定出整改措施，真正体现制度面前人人平等。

6、每月进行应急演练一次，使护士真正碰到突发事件，能正常应对。

五、手术间管理。

1、每月进行一次大搞卫生，对那些平时多依忽略的地方彻底清扫。

2、每天手术开始前，护士用湿布擦拭器械和所有台面。（1：500含氯消毒剂）

3、手术间限制人员数量。每台手术参观人员不超过3人。

4、术中严禁说与手术无关的话。

5、术中保持手术间整洁，不得随地乱扔。

6、手术结束立即清理手术间，以最快捷的方式将污物清除。

六、提高护理人员法律意识。

1、学习《医疗事故处理条例》。

2、学习《医疗费物管理条例》。

3、学习《围手术期护理法律知识》。

4、学习《护士条例》。

5、学习《手术记录书等规则》，保证手术记录准确性，真实性。

七、加强无菌操作与消毒隔离管理。

1、人人掌握无菌技术与无菌操作原则。

（1）、刷手洗手。

（2）、穿戴正规手术服、口罩、帽子。

（3）、穿无菌手术衣，戴无菌口罩、手套及打无菌台。

2、严格执行手术室消毒隔离制度。

（1）、清洁分明严防交叉感染。

（2）、对接车一起每人每车清洁消毒。

（3）、工作人员熟悉消毒及配制。

（4）、加强特殊感染病人管理。

八、加强实习生、节教工作。

1、节教老师应明确自己的职责，选责任心强的主管护师，出科前进行理论操作考试，要求人人过关。

九、以量化考核力为目标使管理取得成绩。

1、护理表格合格率≥90%。

2、手术间监测合格率100%。

3、消毒物品贵重药品合格率100%。

4、抢救药品合格率100%.

5、手术室术前访视率＞80%。

十、增收节支，严禁浪费。

20xx年全年手术例数，手术室在全体人员共同努力下，圆满完成每例手术，受到医院及专家一致好评，在新的一年里，戒骄戒躁，以生命质量第一，患者安全第一为目标，预祝三级医院评比取得可喜的成绩。

20xx年12月30 日

手术室工作总结 篇2

带着一份希翼和一份茫然来到了楚雄州医院，开始了我的实习生涯。从此，我的身份将从一个学生变为了一个实习护士，生活环境将从学校转为医院，接触的对象将从老师，同学转变为医生，护士，病人。对于这三大转变，对于如何做一个合格的实习护士，虽说老师对我们已是千叮咛万嘱咐，可我心里还是忐忑不安的，怪不适应，怕被带教老师骂，害怕自己做得比别人差怕，自己不知从何入手~~~~~

手术室一个让人听了感觉很恐怖又很神秘的名词，手术室的一道门将里外分割成两个世界。让它披上了一层神秘的面纱。所有科室中手术室是另我最向往的科室，因为手术室对我来说很神秘，我带着好奇心来到手术室实习。

每天早晨八点上班，更换好鞋戴好帽子口罩，换好手术室衣服才能进入限制区，更加增强了自己的无菌观念，进入手术室的第一天，老师便对手术室的环境于器械向我们做了大致的介绍，让我认识到了解环境和认识器械的重要意义--让我们在最短的时间内找到所需的物品，同时使我们认识到时间就是生命。我们必须争分夺秒!

在手术室实习期间很荣幸上了两台手术，是剖宫产，我仅仅是帮助持吸引器为了更好的节约手术时间，但是从内心里还是感觉机会的来之不易，从每一个小步骤中我深刻体会到了手术过程中无菌要求的严格程度。我从刷手学起到穿手术衣，戴无菌手套。每一步都严格要求自己，以达到无菌的要求。在手术室我还学会了扎套管针，打大包，打器械包等。

在手术室的实习中，强化了我的无菌观念，增加了无菌原则意识，让我对洗手护士和巡回护士的工作任务有了深刻地认识和了解，使我更加懂得工作之间与护士地配合，与医生配合的重要性。

在手术室实习的日子很短暂，使我了解到手术室刷手的步骤;认识手术器械;开，打无菌包;穿脱手术衣;戴脱无菌手套;无菌用物之供给;装卸刀片;学会手术记录单的填写;手术前，中，后器械的清点等。每一个环节都是不可忽略的部分。对我来说，每个部分都是一种考验和一份不可多得的宝贵经验。原来，只有实践过才知道"百看不如一练"

在手术室一个月的实习生活中感觉自己收获很多，增长了很多见识包括护理知识上，也包括人际关系方面。

在思想教育形式上，充分发挥各科室优秀护理人员的模范带头作用，不定期组织各科室进行学习，强化职工的法律意识、服务意识和质量意识，加强基础护理质量、环节质量、终末质量的全面管理。一年来，涌现出一大批先进人物和典型事迹。XXX XXX 两位老护士长能以自己的实际行动和出色的工作来感染和引导职工，数十年如一日忘我工作，视病人如亲人，用优质的护理服务向人民交上一份满意的答卷。XXX XX XXX一直勤勤恳恳、尽心尽职，在平凡的岗位上实践着一个白衣天使的誓言，深受病人好评。在年轻护士长的队伍中，XXX XXX 等能严格要求自己，以其优良的工作作风，顽强的工作精神努力做好病区的管理工作和后勤保障服务，用爱心和强烈的责任心为临床一线提供全程优质护理服务，成绩是肯定的。门诊服务台的XXX XX 二位主管，工作严谨，服务态度意识强，她们把真诚的微笑送给患者，多次亲自送病人到病区，帮助病人取药，测血压无数，为病人提供简洁的`就医程序，她们热情周到的服务成了门诊大厅一道最亮丽的风景，为医院窗口形象服务树立了楷模。

我们充分感受到护士们的温情服务，面对病人的恐慌，她们用微笑、提供一流的护理服务去缓解;面对病人的种种状况她们用耐心去感化，对待抢救危重病人她们镇静的态度让我们感动、让我们欣慰。

为了适应医疗服务的需求，营造高层次的服务理念和人文关怀，树立良好的社会形象，推动医院持续稳定的发展，我院坚持以病人为中心，在尊重、理解、关怀病人的基础上，为病人提供温馨、周到的人性化服务，尊重病人的人格尊严，重视病人的人格心理需求，以最大限度地满足病人的生理及心理需求，通过方便、快捷、热情周到地为病人提供优质服务，从根本上体现了以病人为中心的服务宗旨。

提倡人性化服务，提高人性化服务的理念，从服务对象的特点和个性出发，开展护理服务，以尊重病人，服务于病人，顺应时代的发展展和现代生活需要为切入点，不断改善服务措施。首先，责任护士要热情接待病人，并把病人送至床边，主动向病人或者家属介绍病区环境，作息时间、规章制度及主治医师等，及时发放护患联系卡，了解病人入院后的心理状态与需求。其次，交待特殊用药、饮食的种类以及各种检查注意事项、手术目的、手术大致经过、卧位、放置管道的注意点及拨管时间，安慰鼓励病人，尽最大的努力解决病人的后顾之忧。第三，提供规范化服务，做到“送药到手，看服入口，服后再走”把亲情化服务纳入工作之中，用充满人爱的亲情去慰藉患者，增强患者战胜疾病的信心，促进早日康复。

加强护患沟通是做好一切护理工作的前提和必要条件，护理部推行住院病人一日督促卡的应用，无形中督促了各科护士主动去观察病情，又增加了护患沟通。缩短了护患之间的距离，有效地预防差错事故的发生。为更好地开展护理工作起到良好的促进作用。护理部实行的一提倡三禁忌，提倡就是“见什么人说什么话”禁说三句“忌语”“我不知道，我正忙着，等一会儿再说”。有效地促进了护士与病人沟通的语言技巧。使催款这个很敏感的话题，不再成为医护合作不愉快的导火线。

随着医学科学的发展，社会的需求，人们观念的改变，对护士的整体素质提出了更高的要求。一个合格的护士不仅需要技术精湛，动作敏捷，富有同情心，护士的行为与尽职精神对护理事业的发展起到良好的推动作用。因此，护理部重点从三个方面着手抓。

手术室实习工作总结3

时间如流水，总是在不经意间悄悄流逝。转眼间，在手术室为期一个月的实习已经接近尾声，也标志着我在手术室的实习生活即将结束。美好的时光总是让人觉得短暂，这一个月的生活仿佛一场梦，但它又是那么真实。回想起手术室的点点滴滴，却是如此清晰……

报到的那天，是个空气清新的早晨。在门岗赵老师的热情接待下，我们正确着装，来到九楼护士站。在那里，张护士长热情地接待了我们，并亲自带领我们熟悉环境，详细介绍了手术室的几个分区，还解说了手术器械和手术室内空气的流通方向，无形之中加深了我们的无菌观念。接下来，我们就在打包间学习打包，熟悉各类器械。当天下午，老师们下手术后就加班加点地对我们进行集中培训，讲解了手术中的一些基本操作，如刷手、穿手术衣、无接触法戴手套等等。看到老师们疲惫但又耐心的神情，我感动，我激励!尤其是龚老师，一下手术他就带了包手术包过来，把我们集中到一间手术室模拟手术的全过程。从开台到手术结束，无微不至，他详细讲解了如何协助医生铺巾，如何摆台，什么是带线，什么是压线，怎样正确传递器械，怎样清点器械等等。每说到一处，他都亲自演示一遍，给我们身临其境的感觉，印象非常深刻。那天，龚老师一直讲到晚上七八点才结束，我们受益颇多，却辛苦了他。这天下来，我对手术室及手术的全过程有了大致的了解，虽然没动手做什么，但内心满满的，感觉非常充实。

第二天，张护士长就为我们安排了各自的带教老师。我的带教老师是张萍老师，她是骨科的专科护士，是位资历深厚的老师，也是位非常严厉的老师，能够得到这么优秀的老师指导，我觉得非常幸运。但同时，我也有很大的压力，因为我还什么都不会，差距无形中总会给人很大的压力。这天，她正好有手术，是巡回护士，我就在旁边观台。那是一台骨科手术，我过去的时候，手术已经开始了，张老师就耐心地从开台开始给我讲解。台上的老师每做一步，她都会说明其缘由和需要注意的地方。我一边听，一边默默地记在心里。看着台上老师那从容的神情，我突然就有了种紧迫感，我也能这样从容不迫吗?可我现在连器械都认不全啊，当时就莫名的产生了种恐惧感。可现实就是这样的，你越怕什么就越来什么。果然，第三天护士长就给我排了手术，我居然要上台当器械护士!不用说都可以想象当时的我有多么狼狈，台上的医生在一边催，台下的张老师又要给我上东西，我真是手忙脚乱啊，忙了这头，忽略了那头。好在没有违反无菌原则，张老师在一旁耐心地指导我，她总会提前告诉我医生下一步要做什么，我需要做好什么准备，不至于让医生久等。在手术间隙，我赶紧拿出布条，一个个对着认器械，不确定的就问老师，恶补这方面的知识。当时真后悔前两天没抓住机会好好学习。当手术慢下来的时候，张老师就在旁边教我摆台，并解说手术的流程。最后，在张老师的指点下，我勉强完成了任务。一台手术下来，我便有了强烈的挫败感，我觉得自己完全跟不上节奏。这该怎么办呢?我开始思考了……

接下来的几天，我每天都跟着骨一科的医生们在六号手术间上手术，张老师就在台下一边做巡回，一边指导我。六号手术间是间净化级别比较高的手术室，主要做些关节置换和脊椎方面的大型手术，无菌要求特别严格，对手术人员的要求也就更高了。最初几天，每次上台我都会特别紧张，因为我知道做的都是大型手术，绝对不能违反无菌原则，我绝不能出任何差错。而那时，我对器械不是特别熟悉，对手术流程也不是特别了解，反应常常慢半拍，有时候还拿错器械，给医生们添了不少麻烦。但医生们都特别好，从不责怪我。有一次，在手术台上，廉院长还亲自教我做纱条，我既感动又愧疚。最害怕的还是突然从医生口中蹦出一些我不熟悉的名词，和医生对不上话，这就非常难过了。记得第一次上膝关节置换术时，医生突然找我要花生米，当时我就懵了，完全不知道是什么东西。张老师连忙告诉我，“就是剥离子，赶紧将小纱布剪一小块，包成花生米大小，毛边不外露，用组织钳夹着就行。”类似的情况，在最初几天多有发生。在手术台上，每一分每一秒都是特别宝贵的，而及时准确地将器械传递到医生手中是我们器械护士的职责。如果因为我的不熟练而延误了手术进程，那是非常不应该的。所以，那几天我总是精神高度集中，全面调动自己的视觉和听觉，时刻关注手术，密切配合医生。由于几乎每天都有手术，而且经常都是下午很晚才能结束，所以我很少去打包间，只能在双休日抽空过来学习。因此，很多器械我都是在手术台上认识的，很多操作也都是在手术台上学会的，所谓现学现用，但现学现用也需要速度和质量的保证。所以，最开始的几天，我的神经都是紧绷着的，那时候还真不习惯。但在张护士长的热心开导下，我明白了，和优秀的人在一起，压力会很大，但是进步会很快，这就是所谓的磨练。的确，那些日子，每天我都能感觉自己是被别人带着在跑，都能学到很多知识。上手术的第一天，我就明显感觉到自己是这支队伍里面最弱的一个，和别人连话都对不上。后来，经过几天的训练，我已经能和医生对上话，有时候还无需医生多言，我就把下一步要用的器械都准备好了。所以，我觉得，做任何事情，都是一个由生疏到熟练的过程，只要我们用心去做，就一定能做得更好。

手术室工作总结 篇3

又到岁末之时，在院领导、护理部的直接领导下，各科室的大力支持下，手术室全体护理同仁始终贯彻“以病人为中心” 这一服务宗旨，为手术病人提供优质安全的护理、精益求精地配合手术做出了应有的贡献。现将本年度的工作总结如下：

一、护理管理方面

1、全科人员做到依法执业，签订了手术室安全责任状。

2、科室内定期组织专业知识和相关法律法规的学习培训及考核。

3、加强了突发公共卫生事件、灾害事故的应急预案，保证消防通道的畅通，进行了手术室突发事件和突发火灾时应急预案的演练。

4、严格记帐制度，做到不错记、多记，也不漏记各种费用。做好物资设备耗材的管理，努力降低医疗服务成本。建立健全医疗设备的登记、保养制度，保证抢救设备物资完好备用率100%。

5、在医疗服务过程中，科室始终把病人安全放在首位，履行相应的社会责任义务，积极参加医院组织的各种医疗义诊活动。

6、11月份开展了手术无菌包追溯系统的管理，制定了操作流程，对科室成员进行了培训。

二、护理安全

1、建立使用腕带识别制度，严格遵守手术病人接送程序及手术病人查对制度，主动邀请患者参与认定，避免了错误的病人，错误的部位，实施错误的手术。

2、建立了手术物品清点制度，器械护士和巡回护士共同清点、核对手术包中各种器械及敷料的名称、数量，并逐项准确记录未发生手术物品遗留体内。

3、建立手术病人安全运送工作指引防病人坠床。严格遵守《临床护理技术规范》中的各管道管理原则，做好妥善固定静脉通道及各种引流管道的相关培训，防止管道的脱落。

4、输血输液、用药均严格执行输血查对、三查八对制度，提高了用药和输血的安全度。

5、植入物使用符合《医疗器械和药品准入制度》及相关规定，建立了植入物使

用记录可追溯到产品名称、型号、数量、生产厂商、供应商。确保了手术植入物安全。

6、建立健全手术室标本留置、送检的制度及操作流程。未发生弄错和丢失标本事件。

7、建立电外科设备管理制度，安全、正确地使用电外科设备。

三、护理质量方面

1、加强护理质量控制安全管理，确保护理质量持续改进，制定了科室护理质控月计划、周计划，每周一次质量检查，每月一次质量汇总分析。

2、对检查存在的问题能及时反馈到当事人并积极整改。在科室早会中重点说明，让科室其他科室成员也知晓，杜绝了类似事件的发生。

3、每月定期召开科会，全员参加，反馈、分析、讨论护理质量控制活动中存在的问题，针对反复出现的问题提出整改意见，杜绝差错事故的发生。20xx年未发生护理不良事件及医疗纠纷。

四、医德医风方面

1、严格落实护士行为规范，在日常工作中使用文明用语。

2、利用晨会、业务学习的机会加强护士服务意识，服务理念的教育，做到主动服务，热情接待，细心介绍，做好各项安抚工作，加强与病人沟通，减少病人对陌生环境的恐惧，增强对手术治疗的信心。

3、尊重和维护患者的合法权益，在术前术后均做好访视，加强与医生的沟通，努力提高专业水平，医护关系融洽。及时倾听病人及家属意见并加以改正，建立服务流程。得到病人和家属较高评价。

4、科室人员都具有严谨、认真的工作态度，刻苦钻研业务，服务热情，不推诿病人，从未向病人及家属索要收取红包。一切以病人为中心，以医院发展为重点，顾全大局，不计个人得失，乐于奉献。

五、医院感染方面

1、严格遵守《医院感染管理规范》，认真执行《消毒隔离制度》。严格执行手术室无菌操作技术原则，对违反无菌原则的人和事及时给予批评纠正。

2、每日晨由主班护士对各种无菌器械包认真检查，整理、使用时再次二人核对，常规器械消毒灭菌合格率100％。

3、组织科内工作人员定期学习院感相关知识，积极参加院内感染知识讲座和培训。院内感染知识考核合格，督促手术人员严格执行无菌原则，加强无菌观念、手卫生依从性，限制参观人数，规范着装。

手术室工作总结 篇4

一、在思想政治方面，积极拥护医院的各项方针和规章制度，以病人为中心，严格按一名优秀合格护士的标准要求自己，视病人如亲人，坚持以病人为核心，病人的满意度为标准。

二、积极学习各项新技术、新业务。作为一名手术室护士，在工作中严格执行各项操作规程，遵守医院科室的规章制度，时刻注意保持无菌观念，对待工作认真负责，加班加点，树立高度的集体责任感和荣誉感，团结同事，凡事以工作为重。为患者提供全方位优质服务，医学全在线搜集整，理与手术医生麻醉医生积极密切配合，团结协作，打造和谐的工作氛围，保证手术顺利完成。

三、积极参加科室组织的危重病人抢救工作，配合各科室做好抢救工作，工作中团结同事，积极进取，严格查对，严谨细致，严防差错事故的发生，在保质保量完成手术过程的同时，还要不断提高自己的操作水平，积极参加各项新业务的开展。参加工作两年年来，我在科室同志们指导下刻苦学习积极进取，掌握了各科手术配合步骤如妇产科、泌尿外科、普外科、肝胆科等等，加深了自己的无菌观念和操作要求。

手术室工作总结 篇5

手术室是一支默默无闻、乐于奉献的集体。正是这种团结协作的团队精神，才能有今天这样好的成绩。随着科室发展，我们忙碌而又充实的走过了一年。在这一年里我们发扬“吃苦、敬业、协作”的精神,时刻不忘病人的需求。在院领导及各级医生的配合和支持下，针对年初的目标，手术室全体医护人员，团结一致，共同奋进，较好地完成手术室的各项工作任务。

在日常工作中，手术室人员爱岗敬业，用自己的爱心、诚心、满足每一位手术病人的需求，把救死扶伤的工作作风贯穿于护理和麻醉工作全过程。加强医护人员的无菌技术操作观念，一年来无差错事故的发生。该年来,未发现手术室引起的伤口感染情况。

手术室能定期对手术内进行安全检查〈氧、水电等〉对有危险苗头的及时汇报领导，进行有效整改。对毒麻药做到专人、专用、专柜、专人登记，做到每日清点，保管得当，急救药品准备齐全，把手术风险尽量减少到零。

接病人能及时准确核对、术中用药能做到三查三对。对各类消毒物品每日清查及时消毒供应，术前核对并检查物品，给手术安全创造良好的条件。手术室全体人员能认真执行岗位制，做到交接班清楚、心中有数。

全年来手术室共完成大小手术近百台，都顺利完成，取得了一定的成绩。享受成功同时也看了到不足，我们在工作中还存在被动性，在管理力度方面离领导要求还有一定距离。在今后的工作中我将不断总结经验、刻苦学习，为医院的服务水平和经济收入再上新台阶而不懈努力，争取明年工作完成的更好！

20xx-12-26

环境因素对微生物的影响实验报告是什么？

环境因素对微生物的影响实验报告如下：

一、 实验目的。

1. 熟悉常用微生物培养基的配置方法。

2. 学习并掌握各种无菌操作技术，并用此技术进行微生物稀释分离、划线分离接种。

3. 用平板划线法和稀释法分离微生物。

4. 认识微生物存在的普遍性，体会无菌操作的重要性。

二、 实验原理。

土壤中有数量巨大、种类丰富的微生物，可以从中分离、纯化得到许多有价值的菌株。从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。常用的是平板分离法。

平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释，使其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品含菌数。

三、 实验器材。

土样10g，牛肉膏蛋白胨培养平板20个，未知菌种平板，当天降雪。

平皿，涂棒，接种环，无菌200ul, 1000ul吸头，记号笔，酒精灯，取液器:1000ul 、200ul各一支，培养箱。

0.9% 无菌生理盐水，250ml三角瓶中装99ml生理盐水,每瓶加约20粒玻璃珠，250ml三角瓶中99ml生理盐水,作100倍稀释用。

四、 实验步骤。

1. 配置培养基：取牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl5g，蒸馏水1000ml配置培养基，调pH至7.2，灭菌。于讲课前倒板20块。

2. 采集野外样品：选择肥沃土壤,去表层土,挖5~20cm深度的土壤数10g,装入烧杯,带回实验室;取校河水装入烧杯，带回实验室；取新积雪中间层转入烧瓶，带回实验室。

3. 制备土壤稀释液：称取土样1.0g，放入盛99ml无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，用手振荡5min使土壤均匀分散成为土壤悬液（10-2）。用200ul的无菌吸头从中吸取0.1ml土壤悬液，注入事先分装有0.9ml无菌水的试管中，吹吸3次，摇匀（10-3）。类推制得10-4、10-5的土壤悬液。

4. 涂板：

1） 土壤稀释液（9块）：用无菌吸头，分别吸取10-3、10-4、10-5浓度土壤稀释液100ul，较均匀地放入已写好稀释度的牛肉蛋白胨培养基平板上，用无菌玻璃涂棒涂匀。每个浓度做3个平板。

2） 单菌落划线（4块）：用接种环挑取未知平班上的菌落，做单菌落划线分离，每人2板。

3） 手指（1块）：分别用未洗过的手指头, 用自来水打湿的手指头，用自来水洗过的手指头，用肥皂洗过的手指头和用酒精棉球擦过的手指头(不用毛巾擦)在同一平板的不同分区涂抹（用力一致）。

4） 硬币（1块）：取3枚1角硬币，按在平板的3个分区。

5） 头发（1块）：放置一根头发，用无菌图布棒压紧在培养基上。

6） 牙垢（1块）：用无菌牙签取一点牙垢在培养基上划线。

7） 空气（2块）：打开培养皿置实验台上（空气中）10min，按无菌操作要求在酒。精灯火焰边打开皿盖1min。

8） 积雪（1块）：用移液器吸取100ul雪水，较均匀地放入已写好稀释度的牛肉蛋。白胨培养基平板上，用无菌玻璃涂棒涂匀。

5. 培养：用报纸包好倒置35℃培养箱里培养24小时。

6. 观察结果：对土壤稀释液平板进行计数，单菌落划线平板分离单菌落，其他平板观。察微生物种类、数量。所有平板都要照相。

无菌技术是怎样的？

了解微生物，就不可避免的要涉及无菌技术。在列文·虎克亲眼看到细菌等微生物后，几乎历经整整2个世纪，人们才逐渐体会到：要研究自然界中随处存在、数量庞大、杂居混生的微生物世界中的某一特定“公民”，首先要为它创造一个无任何杂菌干扰的无菌环境，这就是所谓的无菌技术。无菌技术按其处理后所能达到的无菌程度可分为4类。

(1)灭菌：指彻底、永久地消灭物体内外部的一切微生物；(2)消毒：消除物体表面或内部的部分致病微生物；(3)防腐：完全抑制物体内外部的一切微生物，但一旦将此因素去除，原有的微生物仍可活动；(4)化疗：即利用某种化学药剂对微生物和其宿主间的选择毒力的差别来抑制或杀死宿主体内的微生物，从而达到防治传染病的效果。

无菌技术与人类的经济活动和日常生活息息相关，全世界每年仅因微生物引起的霉烂、腐败、变质而损失的粮食达2%以上，如果我们能自觉地广泛应用无菌技术来防治有害微生物对工农业产品的霉腐或发酵过程的染菌，则经济效益将是很大的。